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发布时间:2022-10-18 点此:439次
辅助生育技术(ART)实验室是辅助生殖中心最重要的组成部分。在这里,卵子和精子结合形成早期的胚胎,度过3~6天的时间,由于人类卵子、精子和胚胎都对环境极其敏感,所以ART实验室不同于一般的实验室。从实验室的环境要求到人员要求都是非常严格的,一般访客也不允许进入。下面我们来看看这个生命起源的神秘地方究竟是怎样运行的。
取卵前一天,实验室的工作人员已经开始准备工作,将每个患者取卵和胚胎培养所需的培养皿记上姓名、病历号等标识,倒入培养液,覆盖好无菌矿物油防止液体的渗透压改变,将其提前放到培养箱里,使其第2天卵子取出来时就能进入最适合他们的温度和酸碱度(pH)环境,舒舒服服地开始ART实验室的“旅程”。
0-6天的“旅程”
第0天(取卵日):取卵通常一早开始,工作人员要提早进入胚胎室打开百级进化台,检查培养箱和各种仪器的状态,准备捡卵用的各种器皿,确保一天工作顺利进行。医生将从患者卵泡中抽取的含有卵子的卵泡传递进入胚胎室,胚胎学家在百级进化、37℃恒温台面的超净工作台内,将其倒入无菌的培养皿,在体式显微镜下寻找卵子,找到卵子后在新鲜的37℃培养基中多次冲洗去掉血细胞,最后将其放至培养箱中等待受精。
在妻子取卵的同时,丈夫通过手淫取得的精液也送到了实验室,通过培养液的洗涤筛选,去除精液中的杂志,提取出动力最好的精子供受精用。如果精液质量好,胚胎学家直接将一定浓度的精子加入防止卵子的培养液中,让其自然结合;如果精液质量差,精子数目或活力不足以使卵子自然受精,胚胎学家会在显微镜下使用显微操作系统用显微注射针将一个精子穿刺注射入一个卵子,帮助其受精,注射好的卵子放回培养液放至培养箱过夜。
第1天(D1):早上,胚胎学家门会观察卵子的受精情况,正常受精的卵子会出现两个原核,出现多于两个原核的受精卵被检出丢弃没正常的受精卵被转移到胚胎培养基中。
第2天(D2):早上再次检查受精卵的发育情况,受精卵这时分裂为2~4细胞(卵裂球)的胚胎,这时胚胎发育速度已显示出差距,有些胚胎会出现碎片,如果碎片持续增多,胚胎质量将下降。
第3天(D3):早上再次检查胚胎的生长情况,此时的胚胎应该发育至6~8细胞,胚胎学家会根据胚胎的发育速度、碎片程度和卵裂球的均一程度给胚胎评分,挑选出D3的可用胚胎,质量差的胚胎将被废弃。如果患者的内膜和激素条件适合移植胚胎,那么胚胎学家会挑选质量好的胚胎移植入患者体内,剩余的胚胎或者冷冻保存,或者转移至囊胚培养液继续培养至囊胚期。
针对胚胎的特殊技术
(1)胚胎活检:对于要进行胚胎植入前移植学筛查(PGS)的胚胎,在第3天胚胎卵裂期或第5~6天囊腔期的时候,胚胎学家需要在显微镜下使用显微操作系统控制特制的胚胎活检针,从胚胎上去下一个或几个细胞,放入细胞裂解液,送到遗传实验室去检测胚胎的遗传物质是否正常。
(2)胚胎的冷冻和复苏:D3、D5、/6的不移植入宫腔的可用胚胎和胚胎活检完毕的胚胎要通过特殊的程序冷冻保存起来,供以后条件适合的时候再次复苏出来进行移植。目前胚胎的冷冻技术非常成熟了,多采用玻璃化冷冻的方式,使用特殊的冷冻保护剂,将胚胎冻存于﹣196℃,复苏的时候将胚胎从液氮中取出,放入复苏成功率可达99%,可以很好地保存胚胎的活性,并且由于冻胚移植周期的激素内膜环境更接近自然状态,成功率普遍比新鲜周期会高一些。
(3)辅助孵化:D3要移植的胚胎,如果观察到透明带有异常,或者冷冻复苏后的胚胎考虑可能会有透明带硬化的情况,胚胎学家会在显微镜下,使用激光辅助孵化系统将部分透明带削薄,目的是使胚胎更容易从透明带削薄的地方孵出。
千万不能搞错
以上各项工作每天都在胚胎室同时进行着,每天胚胎室工作人员都要在不同的岗位完成培养试剂准备、采卵、受精、胚胎评估、移植、胚胎冷冻、胚胎复苏、胚胎活检、辅助孵化等各项工作。同时还要每天监控胚胎室的环境状况和仪器工作状态,以确保每个卵子和胚胎都得到最好的照顾。
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